国家梨产业技术体系病毒病及生理病害研究室以砂梨离体培养植株为研究体系，采用免疫印迹和印迹原位杂交技术观察了热处理过程中苹果茎沟病毒和褪绿叶斑病毒在梨离体植株茎尖中时空分布的动态变化。
1.研究合成了苹果茎沟病毒(Apple stem grooving virus ，ASGV)和褪绿叶斑病毒(Apple chlorotic leaf spot virus，ACLSV)的生物素标记cDNA探针,系统地比较分析了斑点杂交、免疫印迹杂交和ELISA技术检测梨离体植株中ASGV和ACLSV的效果，建立了灵敏、快速的可用于热处理后再生植株中病毒检测的核酸杂交检测技术。
2.以砂梨离体培养植株为研究体系，采用免疫印迹和印迹原位杂交技术观察热处理过程中，苹果茎沟病毒和褪绿叶斑病毒在梨离体植株茎尖中时空分布的动态变化，研究发现较长时间的热处理可以明显降低离体植株茎干顶端病毒浓度，而对茎干基部病毒分布影响较小。该研究结果可为改进热处理技术提高病毒脱除效率提供理论基础。
ACLSV和ASGV在砂梨离体植株中的分布
I：组织印迹杂交检测 (TPH) ，II：组织免疫印迹检测 (TBIA)
34 /40℃ ℃变温热处理5 0d后梨离体植株中ACLSV和ASGV的组织印迹杂交检测结果
A：‘黄花’阳性对照; B：热处理50d‘黄花’离体植株；C：阴性对照
1-12：带病毒植株自茎尖至基部每间隔约1mm横截后在膜上
编辑：张绍铃
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