| 植物内生真菌是近年深受重视的一类重要微生物资源，一般认为它们可产生与宿主植物相同或相似的生物活性物质。银杏是中国特有而丰富的经济植物资源。利用银杏果叶的有效化学成分和特殊医药保健作用加工生产保健食品、药物和化妆品，正引起国内外研究、开发、生产单位的重视。本文报道了江西彭泽产的银杏突变枝、叶内生真菌，以便探讨外界条件的变化对植物内生真菌影响机制提供依据。wqV水果信息网 一、材料与方法wqV水果信息网 1、材料来源本实验用的银杏(Ginkgo biloba L.)突变枝、叶和正常枝、叶采自江西省彭泽县梅花鹿保护区。wqV水果信息网 2、培养基PDA固体培养基。wqV水果信息网 3、内生真菌的分离先用自来水将新鲜植物组织表面冲洗干净，晾干后将突变枝、叶和正常枝、叶切成2cm左右的小段，用75%酒精漂洗1～2rain，无菌水冲洗3～4次，然后用0.2%升汞浸泡2～3min，无菌水冲洗3～4次，按无菌操作的方法将枝的韧皮部及叶切成长宽0.5cm×0.5cm小片，枝韧皮部切成与叶片厚度相当，接种到PDA固体培养基上(临用时在培养基中加80U/mL庆大霉素)，置于28±1摄氏度。温箱培养4—10d，待各植物组织切面长出菌丝后挑取边缘部分移至新的固体培养基上，经纯化后得银杏突变枝、叶和正常枝、叶内生真菌。wqV水果信息网 为检查材料表面的消毒效果，进行如下对照实验：将上述表面消毒过的一部分材料不做剪切，直接种植于PDA平板上作对照培养处理，结果对照材料周围均无任何菌长出，证明表面消毒彻底，保证分离的真菌是植株上的内生真菌，而不是表面的附生菌。wqV水果信息网 4、内生真菌的鉴定采用插片培养方法，对分离获得的银杏内生真菌进行显微形态特征的观察、分类鉴定。wqV水果信息网 二、结果与讨论wqV水果信息网 从银杏(Ginkgo biloba L.)突变枝、叶和正常枝、叶分别分离获得内生真菌16、2O株和22、38株，分别属于l5个属和l6个属。突变枝共有7个属，其优势属为球壳孢属(Sphaeropsis.8p.)，占总菌株31.80%，突变叶共有9个属，其优势属为刺盘孢属(Colletotrichum.sp.)和镰刀菌属(Fusafium.印.)，分别占总菌株25%和20%；正常枝共有9个属，其优势属为球壳孢属(Spha.eropsis.8p.)和匐柄霉属(Stemphylium.印.)分别占总菌31.80%和18.09%，正常叶共有11个属，其优势属为刺盘孢属(Colletotrichum.sp.)和镰刀菌属(Fusarium.sp.)分别占总菌株23.68和21.05%(见表1)。wqV水果信息网 由此可见，银杏(Ginkgo biloba L.)突变枝、叶和正常枝、叶内生真菌优势属相同，但在种类、数量上存在较大的差异，这是因为银杏突变枝、叶产生是受一次雷电袭击而产生(1996年春夏之交)，雷电影响银杏基因发生改变，也就可能影响植物内生真菌的种类和数量，也可以初步说明外界条件对植物内生真菌产生一定的影响，有关形成机制有待进～步研究。 |
